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首页/毒品检测/氯胺酮及其代谢产物检测方法进展

氯胺酮及其代谢产物检测方法进展

作者: 博滴日期: 2015-5-6分类目录: 毒品检测 暂无评论

摘要:氯胺酮是一种易被滥用的精神药物和新型毒品,其在动物和人体内代谢生成去甲氯胺酮和脱氢去甲氯胺酮。氯胺酮及其代谢产物的检测可为氯胺酮滥用者摄毒提供科学证据,也可为其在体内的代谢研究提供检测手段,具有重要的现实意义。目前,用于氯胺酮及其代谢产物的常用仪器检测方法包括气相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱法、液相色谱-质谱联用法以及毛细管电泳法。此外,作为对仪器检测方法的补充,还包括酶联免疫吸附法(ELISA)和胶体金免疫层析法(GICA)等。本文对近年来氯胺酮及其代谢产物的检测方法做一综述,共引用文献25篇。

气象色谱仪

气象色谱仪

氯胺酮(Ketamine)俗称“K粉”,化学名为2-邻氯苯基-2-甲胺基-环己酮,是一种高效麻醉剂,广泛应用于人和动物的手术。氯胺酮在动物和人体内代谢生成去甲氯胺酮,去甲氯胺酮再进一步脱氢生成脱氢去甲氯胺酮。近年来,受国际毒潮泛滥的影响,我国吸食氯胺酮(K粉)的人数呈上升态势。在这一背景下,氯胺酮及其代谢产物的检测可为氯胺酮滥用者涉毒提供科学证据,具有重要的现实意义。本文就氯胺酮检测方法的研究进展作一综述。

1仪器分析方法

1.1气相色谱-质谱联用法为提高灵敏度、改善峰形,氯胺酮在用气相色谱进行检测时往往需要进行衍生。Chou等[1]采用同位素稀释气相色谱-质谱联用法进行尿液中氯胺酮及其代谢产物的检测,发现用五氟丙酰酐(PFBC)用于尿液中氯胺酮和去甲氯胺酮的衍生,衍生化后的分析物可产生更多可检测离子,氯胺酮和去甲氯胺酮回收率分别为70.1%和97.8%。Acikkol等[2]建立一个以HP-5MS毛细管柱气相色谱-质谱联用方法,用氯仿萃取,同时测定饮料中的氟硝西泮、氯硝西泮、阿普唑仑、安定和氯胺酮,测得检出限在1.3~34.2μg/ml之间。Lin等[3]将尿液样本通过浓盐酸水解、碱化并用有机溶剂提取,用色谱-质谱联用法检测氯胺酮、去甲氯胺酮和脱氢去甲氯胺酮,检出限在ng/ml级别。Melent’ev等[4]采用气相色谱-质谱联用法检测全血中的二甲哌替啶(trimeperidine)和氯胺酮,氯胺酮的检出限为0.05μg/ml。Wu等[5]用气相色谱/质谱法同时检测人发中的安非他命、氯胺酮和阿片类,其中测得氯胺酮及去甲氯胺酮检出限为0.05ng/mg。文云波[6]将尿液用10%碳酸钠调节pH=9~10,乙醚液液萃取,GC-MS分析尿液样品中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮和脱氢去甲氯胺酮,测得氯胺酮的检出限为3ng,去甲氯胺酮的检出限为3.6ng(S/N≥3)。闫立强等[7]调节尿液pH至9~10,用GDX-403固相柱萃取,氯仿作洗脱剂,浓缩、定容后,选择209m/z离子碎片为母离子,进行GC-MS-MS分析,通过与氯胺酮标准品的保留时间及二级质谱图比对定性,外标定量。尿中最低检测浓度为4ng/ml,回收率为89.36%。

1.2高效液相色谱法(HPLC)陈小林等[8]建立一种可同时测定海洛因、苯丙胺类、氯胺酮的高效液相色谱(HPLC)法。生物样品采用Strata-XC18固相萃取小柱萃取后,用反相HPLC法对样品进行分离、分析。尿样和血浆中6种毒品线性关系良好,最低检测限为1.2~6.0ng(S/N=3),回收率在98.1%~101.0%之间。Yanagihara等[9]采用液-液萃取技术,建立手性选择性高效液相色谱法检测人血浆中氯胺酮及其代谢产物去甲氯胺酮,测得氯胺酮和去甲氯胺酮检出限分别为5ng/ml和10ng/ml。Rofael等[10]建立了反相高效液相色谱法检测可卡因及其代谢产物和氯胺酮,其中测得氯胺酮的检出限为10ng/ml。单丽娜等[11]探索了以高效液相色谱手性固定相法测定血浆中氯胺酮对映体浓度的方法,采用流动相为甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.02∶0.02),检测波长为269nm,流速为1ml/min,内标为非那西丁,S-氯胺酮与R-氯胺酮最低检测浓度分别为13.0ng/ml和19.5ng/ml。

1.3高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS)Cheng等[12]采用液相色谱-串联质谱方法用于尿样中氯胺酮的快速检测,检出限达到5ng/ml,由于结合了自动固相萃取仪,使得检测效率大为提高,适用于大批量氯胺酮尿样的筛选与确证实验。向平等[13]建立生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。测得毛发中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的最低检出限为0.005~0.05ng/mg。Rosas等[14]建立一个灵敏液相色谱-质谱联用方法,用于检测血浆中的(R)和(S)-氯胺酮,和(R)和(S)-去甲氯胺酮。测得每个手性异构体在1~125ng/ml浓度范围内呈线性相关(r>0.9993)。Tabernero等[15]建立液相色谱-串联质谱方法检测氯胺酮(及其代谢产物去甲氯胺酮)和几种安非他命,检出限分别为0.1和0.5ng/mg。Legrand等[16]建立了一个灵敏的微液相色谱/质谱方法测定氯胺酮和去甲氯胺酮用于儿科临床实验中,氯胺酮和去甲氯胺酮的检出限都为4ng/ml。

Favretto等[17]建立一种液相色谱-高分辨质谱法定量测氯胺酮和其主要代谢物去甲氯胺酮(NK)。该方法在0.05~50ng/mg成线性,氯胺酮与去甲氯胺酮检出限都为0.02ng/mg。Parkin等[18]用超高压液相色谱-串联质谱方法检测氯胺酮及其代谢产物,测得氯胺酮检出限分别为0.03ng/ml,去甲氯胺酮检出限为0.05ng/ml。Harun等[19]用氯胺酮抗体的分子印迹聚合物作为固相萃取吸附剂将氯胺酮及去甲氯胺酮从人的头发中提取出来,利用液相色谱-串联质谱方法检测人发中的氯胺酮和去甲氯胺酮,测得氯胺酮与去甲氯胺酮检出限皆为0.1ng/mg的头发。

1.4毛细管电泳法毛细管电泳技术具有分辨率高、样品用量少的优势,近年来已成为气相色谱和液相色谱法分析生物检材中毒品的有益补充。姚丽娟等分别尝试了用液-液提取技术对血中氯胺酮进行萃取[20],以安定为内标,用毛细管电泳方法分析检测,最低检出限可达30ng/ml;林宜慧等[21]在毛细管电泳的进样方式方面,探索了阳离子耗尽进样和胶束扫集联用方法,测定了药物滥用者头发中的吗啡、可待因、氯胺酮和甲基苯丙胺,检出限50~200pg/mg。

2免疫分析法

2.1酶联免疫吸附法(ELISA)ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。Negrusz等[22]采用微孔板酶联免疫吸附技术,研究了灵长类动物尿液中氯胺酮及去甲氯胺酮的消除情况和检测时效。发现随氯胺酮注射剂量的不同,其检测时效在1~10d不等;去甲氯胺酮在尿液中检出的时效则可长达31~35d。张雯迪等[23]建立了检测氯胺酮的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA),在优化条件下,方法的线性范围为0.1~1000μg/L,检出限为0.03μg/L。氯胺酮生物样品的加标回收率为94%~102%。与酶标二抗体系ELISA法相比,BA-ELISA具有更高的灵敏度,适于低浓度氯胺酮的检测。

2.2胶体金免疫层析法(GICA)曾立波等[24]将胶体金单克隆抗体免疫层析检测板用于氯胺酮的现场快速检测,适用样品包括水和多种饮料,通过用肉眼观察检测区的条带来确定阳性或阴性,检测限可达50ng/ml。丁建祖等[25]采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记氯胺酮单克隆抗体,制成免疫层析试纸条(GICA),检测尿样氯胺酮的灵敏度可达1000ng/ml,GICA与GC-MS同步检测138份尿样比较,GI-CA的敏感性达97.4%,对健康人的阴性符合率为100%。两法的总符合率达99.3%。

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